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“這里是實(shí)驗(yàn)室，你跟著我們的工作人員一步一步來做，或許你就會(huì)明白DNA鑒定是怎么回事。”上海親子鑒定中心法醫(yī)物證司法鑒定所助理研究員張宇跟記者說了多遍操作流程，記者還是無法理解。隨后，他讓記者跟隨劉軍、楊麗兩位實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，一步步見證DNA鑒定結(jié)果是如何出爐的。 第一步：待檢準(zhǔn)備 唾液飛沫絕不能混入 走入該鑒定所實(shí)驗(yàn)室的大門前，記者被要求套了鞋套并換上消毒干凈的服裝。實(shí)驗(yàn)人員則全副武裝：一次性的帽子、口罩、手套，一樣都不能少。 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)域后，記者發(fā)現(xiàn)了一個(gè)有趣的現(xiàn)象：實(shí)驗(yàn)室的走廊外，畫著一個(gè)個(gè)醒目的前行箭頭。據(jù)介紹，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人，必須要嚴(yán)格按照這地上的箭頭行進(jìn)；而且，每進(jìn)一個(gè)房間，就要換不同的衣服，誰(shuí)也不可走“回頭路”。“這主要是為了預(yù)防實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌的交叉?zhèn)魅荆_保DNA準(zhǔn)確率。”楊麗說。 “帽子要戴到頭發(fā)不外露的程度，口罩就不用說了，手套也要包住袖口。”劉軍說，這些都是為了讓檢材不受到任何影響。為了說明這個(gè)問題，他舉了個(gè)例子：在很多年以前，有個(gè)同事做DNA鑒定，由于沒戴口罩，同事的唾液飛沫掉進(jìn)了裝DNA樣本的小試管里。最后檢出的結(jié)果里邊，居然有這個(gè)同事的DNA信息。換句話說，這次實(shí)驗(yàn)失敗了。 第二步：DNA提取 100℃下孵育10分鐘逼出DNA 目前，最為常見的是通過血液進(jìn)行DNA鑒定，也就是說，要采集血樣做鑒定。 “試管內(nèi)我們已經(jīng)提前放入了DNA提取液。”楊麗說，血液標(biāo)本內(nèi)有紅細(xì)胞、白細(xì)胞及雜質(zhì)等諸多東西，提取液的作用是將DNA提取出來，并去除其他的物質(zhì)。 提取完成后，要把小試管放入干式恒溫器。“這一步的作用是孵育DNA，孵育環(huán)境是100℃的溫度，時(shí)長(zhǎng)是10分鐘。”劉軍說，通過孵育，NDA將充分暴露，更方便提取。
第三步： 冰箱冷藏 試劑和DNA樣本充分混合 取樣完成后，要將DNA 的提取物放到冰箱冷藏備用。等提取物冷卻后，再拿出一個(gè)更小的試管，這個(gè)新試管當(dāng)中有從試劑盒中調(diào)配的試劑。 這是最為費(fèi)錢的一步，因?yàn)樵噭┖惺沁M(jìn)口的，每次加入的試劑費(fèi)用就要數(shù)百元 。在進(jìn)入加樣區(qū)之前，實(shí)驗(yàn)人員先是打開了紫外線消毒燈。“現(xiàn)在要對(duì)整個(gè)房間進(jìn)行消毒，確保加樣房間沒有任何的病菌及粉塵等，實(shí)驗(yàn)者也盡量不要說話。” 實(shí)驗(yàn)人員提醒道。 試劑里邊包括酶、引物等試劑，每個(gè)試管要加入0.2微升。加入試劑后，要將小試管放入小的混合器，讓試劑和DNA樣本充分混合。 第四步：擴(kuò)增 DNA提取物不斷繁殖分裂 為了能達(dá)到檢測(cè)需求的量，要把小試管放入一個(gè)叫做擴(kuò)增儀的儀器。把試管放入擴(kuò)增儀后，里邊的DNA提取物將不斷繁殖、分裂。 在一般情況下，經(jīng)過2-3個(gè)小時(shí)的擴(kuò)增，DNA提取物的量就能達(dá)到檢測(cè)量。也就是說，要真正進(jìn)行DNA 檢測(cè)、比對(duì)了。 第五步：檢測(cè) 提取16個(gè)位點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì) 檢測(cè)是在一個(gè)叫做310熒光自動(dòng)測(cè)序儀當(dāng)中進(jìn)行的，這種設(shè)備非常先進(jìn)，把擴(kuò)增完的小試管放入儀器后，設(shè)備會(huì)自動(dòng)從試管中提取DNA提取物，然后自動(dòng)選擇DNA位點(diǎn)，分析染色體。在一般情況下，設(shè)備會(huì)自動(dòng)提取16個(gè)位點(diǎn)，然后，系統(tǒng)自動(dòng)將需要做親子鑒定的兩個(gè)樣本進(jìn)行自動(dòng)比對(duì)。 根據(jù)遺傳學(xué)原理，如果所有的位點(diǎn)遺傳信息都能匹配成功，我們也就能大概說，這對(duì)父子或者母子是親子關(guān)系。即便有一兩個(gè)位點(diǎn)不能成功匹配，在一般情況下，也能作出否定的結(jié)論。“每個(gè)人都會(huì)有兩條染色體，一條是父親給予的，另一條是母親給予的。在同一個(gè)點(diǎn)位上也會(huì)出現(xiàn)兩條相同的數(shù)值，一個(gè)數(shù)值來自母親，另一個(gè)數(shù)值來自父親。如果孩子有的數(shù)值父親和母親的都沒有，那么他們就很有可能不是親子關(guān)系。”當(dāng)然，這是最簡(jiǎn)單、最直觀的看法，要判斷孩子是否是親生，還要經(jīng)過更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)挠?jì)算。 計(jì)算時(shí)，有個(gè)親權(quán)指數(shù) (PI) 計(jì)算，因?yàn)樵谠摴筋愃朴冢╬除以p+1）的模式，這個(gè)模式?jīng)Q定其結(jié)果不可能是整數(shù)。而且，因?yàn)槭郎蠜]有絕對(duì)相同的DNA，因此大概只能算出約99.9%的準(zhǔn)確率。
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